Science Advances：互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水用于擴(kuò)展和優(yōu)化生物3D打印能力

來(lái)源： EngineeringForLife

現(xiàn)階段，能夠用于生物3D打印的生物墨水?dāng)?shù)量非常有限，這是因?yàn)闈M足生物打印需求的墨水既要滿足打印過(guò)程中的理化需求，又要為其中所包裹的細(xì)胞提供理想的環(huán)境。生物墨水的設(shè)計(jì)是生物3D打印中的關(guān)鍵因素，但現(xiàn)有生物墨水配方中很少有同時(shí)滿足可打印性及生物相容性的配方，通常情況下生物墨水的可打印性和生物相容性是相互排斥的，為了兼容生物相容性及可打印性，會(huì)在兩者的性能要求上都做出讓步。

近期，來(lái)自倫敦帝國(guó)理工學(xué)院生物醫(yī)學(xué)工程研究所的Molly M. Stevens團(tuán)隊(duì)，在Science Advances發(fā)表的“Expandingand optimizing 3D bioprinting capabilities using complementary network bioinks”一文中，研究人員通過(guò)使用互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水實(shí)現(xiàn)了生物3D打印過(guò)程中成型性和生物相容性之間更好地兼容。該研究中所用的生物墨水同時(shí)具有溫敏性及光敏性，它們通過(guò)互補(bǔ)的凝膠機(jī)制來(lái)調(diào)節(jié)打印過(guò)程的不同階段。在該研究中，研究人員通過(guò)篩選合適濃度的水凝膠剛度以實(shí)現(xiàn)星形膠質(zhì)細(xì)胞的3D打印及培養(yǎng)，并進(jìn)行了互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水應(yīng)用于組織工程的探索，且最終滿足細(xì)胞培養(yǎng)和組織工程的生物學(xué)需求。

首先，研究人員通過(guò)使用甲基丙烯酸透明質(zhì)酸(HAMA)作為代表性的生物墨水進(jìn)行了打印及流變學(xué)測(cè)試（圖1），對(duì)該生物墨水在目前打印方法中所存在的問(wèn)題及互補(bǔ)型網(wǎng)絡(luò)生物墨水的優(yōu)勢(shì)進(jìn)行了說(shuō)明。

圖1.互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水3D打印工藝

其次，研究人員嘗試將互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水的原理推廣應(yīng)用于其他聚合物上，包括基質(zhì)衍生蛋白、基質(zhì)衍生糖胺聚糖及其他天然多糖(表1)。為此，研究人員使用了12種可光交聯(lián)生物墨水進(jìn)行打印驗(yàn)證（圖2）（HAMA+、HANB+、GelMA+、GelAGE+、CSMA+、DexMA+、AlgMA+、CHIMA+、HepMA+、PEGDA+、PEGA+和PEGNB+），并優(yōu)化了在不同濃度下的互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水的3D打印參數(shù)；最終證實(shí)了明膠成分主要決定了生物墨水的可打印性。

表1 該研究所適用的生物墨水

圖2 互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水庫(kù)的3D打印

開(kāi)發(fā)互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水的主要目的是為了實(shí)現(xiàn)軟水凝膠結(jié)構(gòu)的3D打印。所以研究人員對(duì)軟水凝膠中明膠的添加對(duì)機(jī)械性能的影響進(jìn)行了測(cè)試，研究人員對(duì)比了三種軟水凝膠互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水(HANB+、GelMA+和GelAGE+)和其無(wú)明膠成分生物墨水打印結(jié)構(gòu)的機(jī)械性能。最終結(jié)果表明明膠的加入對(duì)打印結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)期機(jī)械性能影響很小。

圖3 3D打印軟水凝膠結(jié)構(gòu)

最后，研究人員經(jīng)進(jìn)行了不同濃度(2.5 -10 wt%)的互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水進(jìn)行星形膠質(zhì)細(xì)胞的3D打印和培養(yǎng)（圖4），通過(guò)最終細(xì)胞增殖結(jié)果來(lái)看，（2.5 wt%）的GelMA+生物墨水能夠維持良好的細(xì)胞活力。研究人員后續(xù)對(duì)互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水在組織工程上的應(yīng)用也進(jìn)行了探索，結(jié)果表明其具有較好的效果（圖5）。

圖4 星形膠質(zhì)細(xì)胞的生物打印和培養(yǎng)

圖5 互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水用于組織工程的探索

綜上所述，該研究引入了互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水的概念，其作為一種通用的生物3D打印方法為3D打印活組織結(jié)構(gòu)提供了更為有效的策略，從而可以更容易地調(diào)整生物墨水以滿足細(xì)胞打印的生物學(xué)要求。一方面，該研究通過(guò)生物打印負(fù)載星形膠質(zhì)細(xì)胞的軟水凝膠，表明了互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水適用于軟組織來(lái)源的活結(jié)構(gòu)的生物制造。另一方面，該研究提出了互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水庫(kù)，極大地?cái)U(kuò)展了該方法所適用的生物墨水的范圍�？偠�言之，雖然互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水不適用于那些不能與明膠混容的生物材料及溫敏反性生物材料，但除去這些材料外，該研究中的互補(bǔ)網(wǎng)絡(luò)生物墨水在不同的生物材料體系和3D打印方案中仍具有廣泛的適用性，并為生物制造和組織工程提供新的機(jī)會(huì)。